Acridine Orange屬于三環(huán)雜芳香燃料，可以標記DNA、RNA，屬于異染性熒光染料。該染料具有膜通透性，能透過細胞膜，使核DNA和RNA染色，因此AO常用于細胞內(nèi)DNA和RNA進行檢測。AO與核酸結合方式主要有：1、插入性結合，AO嵌入核酸雙鏈的堿基對之間，這種結合方式主要為AO與DNA的結合，其熒光發(fā)射峰為530nm，激發(fā)后呈綠色熒光；2、靜電吸引，帶正電荷的AO與單鏈核酸的磷酸根（帶負電荷）產(chǎn)生靜電間的吸引結合，這種結合方式主要為AO與RNA的結合，其熒光發(fā)射峰為640nm，激發(fā)后呈紅色熒光，少量結合會呈橘黃色或桔紅色熒光，因此吖啶橙嵌合到雙鏈DNA中顯綠色，與單鏈DNA或RNA結合時發(fā)橘黃色或橙紅色熒光。

Leagene AO染色液（1mg/ml）為儲存液，使用時應稀釋到合適濃度后使用，染色后在熒光顯微鏡下觀察，AO可透過正常細胞膜，使細胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光；而在凋亡細胞中，因染色質固縮或斷裂為大小不等的片段，形成凋亡小體。AO使其染上致密濃染的黃綠色螢光或黃綠色碎片顆粒，而壞死細胞黃熒光減弱甚至消失；AO染色常與EB染色合用雙染，因EB只染死細胞使之產(chǎn)生橘黃色熒光，由此可區(qū)分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞。該試劑僅用于科研領域，不適用于臨床診斷或其他用途。